Эндануклеаза рэстрыкцыі BsaI
Апісанне
Рэстрыкцыйны фермент BsaI - гэта эндануклеаза рэстрыкцыі II тыпу, атрыманая з рэкамбінантнага бялку, які кадуецца генам BspQI у Bacillus sphaericus, які экспрэсуецца E.coli.Эндануклеазы рэстрыкцыі шырока выкарыстоўваюцца ў картаграфаванні генаў, кланаванні і іншых галінах.Гэты фермент хутка разразае ДНК для эфектыўнай лінеарызацыі гена Bsa I, рэстрыкцыйная эндануклеаза IIs, атрыманая з рэкамбінантнага штаму E. coli, які нясе кланаваны і мадыфікаваны ген BsaI з Bacillus stearothermophilus.якія валодаюць той жа спецыфічнасцю, што і натыўныя ферменты, і зніжанай актыўнасцю зоркі.Яго паслядоўнасць распазнання і сайты расшчаплення наступныя:
5'······GGTCTC(N)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)······5'
Хімічная будова
Асаблівасці прадукту
• Эндануклеаза рэстрыкцыі валодае высокай ферментатыўнай актыўнасцю і хутка завяршае рэакцыю стрававання.
• Нізкая актыўнасць неспецыфічнай эндануклеазы для забеспячэння дакладнай рэзкі «скальпелем».
• Адсутнасць сістэмы BSA, памяншае забруджванне крыніцы цяпла.
Спецыфікацыя
Тэставыя прадметы | Тэхнічныя характарыстыкі |
Актыўнасць ферментаў | 20 ЕД/мкл |
Чысціня (SDS-PAGE) | ≥95% |
Рназа | Нічога не выяўлена |
Неспецыфічныя ДНКазная актыўнасць | Не выяўлена |
Зорная актыўнасць | Не выяўлена |
Перавязка і перарэзка | Пасля пераварвання фрагменты ДНК можна звязаць.І гэтыя перавязаныя фрагменты можна паўторна выразаць Bsal. |
Эндатаксіны (LAL-тэст) | ≤10 ЕС/мг |
ДНК E.Coli | ≤1 копія/2U |
Кантроль якасці
Чысціня ≥ 95%, адсутнасць ДНКазы, актыўнасць РНКазы, рэшткі ДНК гаспадара ≤ 100 пг/мг, рэшткі бялку гаспадара ≤ -50 частак на мільён, рэшткі эндатаксіну ≤ 10 ЕУ/мг, адсутнасць актыўнасці пратэазы, стэрыльны, без мікоплазмы
Ужыванне
Пераварыць плазміду для падрыхтоўкі лінеарызаванага фрагмента ДНК у канцы Poly (A/T/C/G);
Лінеарызаваць шаблон плазміды перад транскрыпцыяй in vitro;
Дайджэст абмежаванняў;
Вызначэнне адзінкі
Адна адзінка вызначаецца як колькасць фермента, неабходнага для пераварвання 1 мкг ДНК ўнутранага кантролю за 1 гадзіну пры 37°C у агульным рэакцыйным аб'ёме 50 мкл
Транспарціроўка і захоўванне
Транспарт:Пастаўляецца пры тэмпературы -15°C
захоўванне:Захоўваць пры -25~-15°C
Рэкамендаваны паўторны тэст Life:1 год