Прэмікс Multiplex One Step RT-qPCR
Апісанне
Кат. №: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix - гэта мультыплексны набор для колькаснай ПЦР на аснове РНК у якасці шаблону.У эксперыменце зваротная транскрыпцыя і колькасная ПЦР праводзяцца ў адной рэакцыйнай прабірцы, што спрашчае эксперыментальную аперацыю і зніжае рызыку заражэння.Унікальная канструкцыя буфера і сумесі ферментаў можа быць выкарыстана ў аднаступеньчатай ліяфілізаванай сістэме.У наборы выкарыстоўваецца тэрмаўстойлівая зваротная транскрыптаза для эфектыўнага сінтэзу першай ланцуга кДНК з выкарыстаннем гарачага старту Taq ДНК-палімеразы для колькаснай ампліфікацыі.Ён утрымлівае аптымізаваны рэакцыйны буфер, сумесь ферментаў і г.д., і былі дададзены фактары, якія эфектыўна інгібіруюць неспецыфічную ПЦР-ампліфікацыю і павышаюць эфектыўнасць ампліфікацыі некалькіх рэакцый кПЦР, што забяспечвае шматразовую колькасную ампліфікацыю флуарэсцэнцыі, адначасова забяспечваючы эфектыўнасць ампліфікацыі праймераў.
Кампаненты
| Імя |
| 1. Ліё-буфер |
| 2. Лио-ферментная сумесь |
| 3. Ліё ахоўны сродак |
Транспартныя ўмовыіён
A: Ліё-буфер і ахоўны сродак: -25 ~ -15 ℃, тэрмін захоўвання 1 год.
Б: Ліёферментная сумесь, 2-8 ℃, тэрмін захоўвання 6 месяцаў.
Інструкцыя па эксплуатацыі
1. Рэакцыйная сістэма (у якасці прыкладу возьмем 25 мкл)
| Кампаненты | Аб'ём (мкл) | Канчатковая канцэнтрацыя |
| Ліё-буфер | 6 | 1* |
| Ліё-ферментная сумесь | 1 | - |
| Ліё-пратэктар | 8 | - |
| Праймерная сумесь (10 мкМ) | 1 | 0,1-1 мкМ |
| Сумесь зондаў (10 мкМ) | 0,5 | 0,05-0,5 мкМ |
| Шаблон РНК | 5 | - |
| DEPC H2O | Да 25 | - |
2. Аптымізаваны веласіпедны пратакол
1) Стандартны веласіпедны пратакол
| Стадыя рэакцыі | тэмпература | Час | Цыкл | |
| 1 | Зваротная транскрыпцыя | 50°Ca | 10 хвілін | 1 |
| 2 | Пачатковая дэнатурацыя | 95°C | 5 хвілін | 1 |
| 3 | Рэакцыя ампліфікацыі | 95°C | 15 сек | 45 цыклаў |
| 60°Cb | 30 секc |
2) Пратакол хуткага цыклу
|
| Стадыя рэакцыі | тэмпература | Час | Цыкл |
| 1 | Зваротная транскрыпцыя | 50°Ca | 2 хвіліны | 1 |
| 2 | Пачатковая дэнатурацыя | 95°C | 2 сек | 1 |
| 3 | Рэакцыя ампліфікацыі | 95°C | 1 сек |
45 цыклаў |
| 60°Cb | 13 секc |
нататка:
a) Рэверс транскрыпцыя: Тэмпература можа быць 42°C або 50°C на працягу 10-15 хвілін.
b) Рэакцыя ампліфікацыі: Тэмпература рэгулюецца ў адпаведнасці са значэннем Tm распрацаваных грунтовак.
в)Флуарэсцэнцыя сігнал набыццё: Усталюйце эксперыментальную працэдуру ў адпаведнасці з патрабаваннямікіраўніцтва па прыборы.
Тэхнічная інфармацыя/характарыстыкі
| Гарачы старт | Убудаваны гарачы старт |
| Спосаб выяўлення | Праймер-зонд выяўлення |
| Метад ПЦР | Аднаэтапная RT-кПЦР |
| Тып выбаркі | РНК |
Заўвагі
1. Гэты прадукт прызначаны толькі для навуковага выкарыстання.
2. Калі ласка, апранайце неабходныя СІЗ, такія як лабараторны халат і пальчаткі, каб гарантаваць ваша здароўе і бяспеку！
