Пероксидаза (крыніца хрэна) Сінонім: Оксидоредуктаза пераксіду вадароду;ПЧ
Апісанне
Пероксидаза хрэна (HRP) вылучаецца з каранёў хрэна (Amoracia rusticana) і належыць да ферропротопорфириновой групы пероксидаз.HRP лёгка злучаецца з перакісам вадароду (H2O2).Атрыманы ў выніку комплекс [HRP-H2O2] можа акісляць шырокі спектр донараў вадароду:
Донар + H2O2 → Акіслены донар + 2 H2O
HRP акісляе розныя субстраты (гл. Табліцу 1):
• Храмагенныя
• Хемілюмінесцэнтныя (напрыклад, люмінол або ізалюмінол)
• Фторагены (напрыклад, цірамін, гомованілавая кіслата або 4-гідраксіфенілацатная кіслата)
HRP - гэта поліпептыд з адной ланцугом, які змяшчае чатыры дысульфідныя масткі.ПХ - гэта глікапратэін, які змяшчае 18% вугляводаў.Вугляводны склад складаецца з галактозы, арабинозы, ксілозы, фукозы, маннозы, маннозамина і галактозамина ў залежнасці ад канкрэтнага изофермента.
HRP - гэта шырока выкарыстоўваная пазнака для імунаглабулінаў у розных імунахімічных прымяненнях, у тым ліку імунаблотінг, імунагістахімія і ELISA.HRP можа быць кан'югаваны з антыцеламі некалькімі рознымі метадамі, у тым ліку глутаравым альдэгідам, перйодатным акісленнем, праз дысульфідныя сувязі, а таксама праз аміна- і тиоловые сшывальнікі.HRP з'яўляецца найбольш жаданай меткай для антыцелаў, паколькі яна з'яўляецца самай маленькай і самай стабільнай з трох найбольш папулярных ферментных этыкетак (пероксидаза, β-галактозидаза, шчолачная фасфатаза), а яе гликозилирование прыводзіць да зніжэння неспецыфічнага звязвання.Апублікаваны агляд метадаў кан'югацыі глутаральдэгіду і перыядата.
Пероксидаза таксама выкарыстоўваецца для вызначэння глюкозы4 і пераксідаў у растворы.Некалькі публікацый, тэзісы 6-24, 25-29 і дысертацыі 30-46 спасылаюцца на выкарыстанне P8375 у сваіх пратаколах даследаванняў.
Хімічная будова
Спецыфікацыя
Тэставыя прадметы | Тэхнічныя характарыстыкі |
Апісанне | Чырванавата-карычневы аморфны парашок, лиофилизированный |
актыўнасць | ≥100U/мг |
Чысціня (SDS-PAGE) | ≥90% |
Растваральнасць (10 мг парашка/мл) | Ясна |
Змяшчаюць ферменты | |
НАДН/НАДФН-аксідаза | ≤0,1% |
Каталаза | ≤0,005% |
АТФаза | ≤0,03% |
Транспарціроўка і захоўванне
Транспарт:Дастаўляецца пры тэмпературы 2-8°C
захоўванне:Захоўваць пры -20°C (доўгі тэрмін), 2-8°C (кароткатэрміновы)
Рэкамендаваны паўторны тэстжыццё:2 гады