Bst 2.0 ДНК-палімераза (без гліцэрыны, высокай шчыльнасці)
ДНК-палімераза Bst V2 паходзіць ад ДНК-палімеразы I Bacillus stearothermophilus, якая мае актыўнасць ДНК-палімеразы 5′→3′ і моцную актыўнасць замены ланцуга, але не мае экзануклеазнай актыўнасці 5′→3′.ДНК-палімераза Bst V2 ідэальна падыходзіць для перамяшчэння ланцугоў, ізатэрмічнай ампліфікацыі LAMP (ізатэрмічнай ампліфікацыі, апасродкаванай петлёй) і хуткага секвенавання.Гэтая Bst ДНК-палімераза V2 здольная інгібіраваць актыўнасць ДНК-палімеразы пры пакаёвай тэмпературы, так што яна можа працаваць і рэакцыйная сістэма можа быць сфармулявана пры пакаёвай тэмпературы, прадухіляючы неспецыфічную ампліфікацыю і паляпшаючы эфектыўнасць рэакцыі, і гэтая версія можа быць лиофилизированным.Акрамя таго, ён здольны праяўляць сваю актыўнасць пры падвышаных тэмпературах, што пазбаўляе ад неабходнасці асобнага этапу актывацыі.
Кампаненты
| Кампанент | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ДНК-палімераза V2 (без гліцэрыны) (32U/мкл) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
| Буфер 10×HC Bst V2 | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
| MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Прыкладанні
1.LAMP ізатэрмічнае ўзмацненне
2.Рэакцыя адзінкавага зрушэння ланцуга ДНК
3.Высокае секвенирование гена GC
4.Секвенирование ДНК нанаграммового ўзроўню.
Умовы захоўвання
Транспарціроўка пры тэмпературы ніжэй за 0°C і захоўванне пры тэмпературы ад -25°C~-15°C.
Вызначэнне адзінкі
Адна адзінка вызначаецца як колькасць фермента, які ўключае 25 нмоль dNTP у нерастваральны ў кіслаце матэрыял за 30 хвілін пры 65°C.
Рэакцыя LAMP
| Кампаненты | 25 мклсістэма |
| Буфер 10×HC Bst V2 | 2,5 мкл |
| MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мкл |
| dNTP (10 мМ кожны) | 3,5 мкл |
| SYTO™ 16 зялёны (25×)a | 1,0 мкл |
| Сумесь грунтоўкіb | 6 мкл |
| Bst ДНК-палімераза V2 (без гліцэрыны) (32 ЕД/мкл) | 0,25 мкл |
| Шаблон | × мкл |
| ddH₂O | Да 25 мкл |
Заўвагі:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): у адпаведнасці з эксперыментальнымі патрэбамі, іншыя фарбавальнікі могуць быць выкарыстаны ў якасці замены;
2) б.Праймерная сумесь: атрымана шляхам змешвання 20 мкМ FIP, 20 мкМ BIP, 2,5 мкМ F3, 2,5 мкМ B3, 5 мкМ LF, 5 мкМ LB і іншых аб'ёмаў.
Рэакцыя і стан
1 × буфер HC Bst V2, тэмпература інкубацыі ад 60°C да 65°C.
Цеплавая інактывацыі
80°C, 20 хвілін.
