One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Кат. №: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) - гэта набор для хуткага выяўлення RT-qPCR на аснове зонда, прыдатны для адна- або мультыплекснай колькаснай ПЦР з выкарыстаннем РНК у якасці шаблону (напрыклад, РНК-віруса).У гэтым прадукце выкарыстоўваецца новае пакаленне мадыфікаванай антыцеламі ДНК-палімеразы Taq і аднаэтапнай спецыяльнай зваротнай транскрыптазы з аптымізаваным буферам для хуткай ампліфікацыі, якая мае большую хуткасць ампліфікацыі, больш высокую эфектыўнасць і спецыфічнасць.Ён падтрымлівае збалансаванае ўзмацненне як у адзіночным, так і ў мультыплексным узорах нізкай і высокай канцэнтрацыі за кароткі час.
Кампаненты
1. Буфер 5×RT-qPCR (U+)
2. Сумесь ферментаў (U+)
Заўвагі:
а.Буфер 5×RT-qPCR (U+) уключае dNTP і Mg2+;
б.Сумесь ферментаў (U+) уключае зваротную транскрыптазу, ДНК-палімеразу Hot Start Taq, інгібітар РНКазы і УДГ;
в.Выкарыстоўвайце наканечнікі без РНКазы, прабіркі EP і г.д.
Перад выкарыстаннем старанна змяшайце буфер 5×RT-qPCR (U+).Калі пасля адтавання ёсць ападкі, дачакайцеся, пакуль буфер вернецца да пакаёвай тэмпературы, змяшайце і растварыце, а затым выкарыстоўвайце іх у звычайным рэжыме.
Умовы захоўвання
Прадукт пастаўляецца з сухім лёдам і можа захоўвацца пры -25 ~ -15 ℃ на працягу 1 года.
Інструкцыя
1. Рэакцыя сістэма
| Кампаненты | Аб'ём (20 мкл рэакцыя) |
| 2 × буфер RT-qPCR | 4 мкл |
| Сумесь ферментаў (U+) | 0,8 мкл |
| Буквар наперад | 0,1~ 1,0 мкМ |
| Буквар адваротны | 0,1~ 1,0 мкМ |
| Зонд TaqMan | 0,05~0,25 мкМ |
| Шаблон | X мкл |
| Вада без РНКазы | да 25 мкл |
Заўвагі: Рэакцыйны аб'ём складае 10-50 мкл.
2. Велапратакол (Sстандартны)
| Цыкл крок | тэмп. | Час | Цыклы |
| Зваротная транскрыпцыя | 55 ℃ | 10 хв | 1 |
| Першапачатковая дэнатурацыя | 95 ℃ | 30 сек | 1 |
| Дэнатурацыя | 95 ℃ | 10 сек | 45 |
| Адпал/Пашырэнне | 60 ℃ | 30 сек |
| Велапратакол (Хутка) Цыкл крок |
тэмп. |
Час |
Цыклы |
| Зваротная транскрыпцыя | 55 ℃ | 5 хвілін | 1 |
| Першапачатковая дэнатурацыя | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Дэнатурацыя | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Адпал/Пашырэнне | 60 ℃ | 10 с |
Заўвагі:
а.Тэмпература зваротнай транскрыпцыі складае ад 50 ℃ да 60 ℃, павышэнне тэмпературы дапамагае ўзмацніць складаныя структуры і шаблоны з высокім утрыманнем CG;
б.Аптымальную тэмпературу адпалу неабходна адрэгуляваць у залежнасці ад значэння Tm праймера і выбраць самы кароткі час для збору сігналу флуарэсцэнцыі на аснове прыбора ПЦР у рэальным часе.
Заўвагі
Калі ласка, апранайце неабходныя СІЗ, такія як лабараторны халат і пальчаткі, каб гарантаваць ваша здароўе і бяспеку!
