Полі А-носьбіт РНК

Кат. №: HC4001A

Полі А, поліадэнілат, уяўляе сабой сумесь з 100 ~ 10000 поліадэнілатаў, якая полімерызуецца полінуклеатыдфасфарылазай in vitro.In vivo полі (а) дадаецца да 3-канца мРНК з дапамогай фермента для павышэння стабільнасці мРНК.Пры ўжыванні экстракцыі нуклеінавых кіслот даданне полі А ў лізат або звязваючы раствор можа палепшыць выхад ДНК і РНК.Механізмполі А, які паляпшае выхад нуклеінавай кіслаты, заключаецца ў наступным:

1. Насычаны кантакт з адсорбцыяй паверхні вырабаў.Большасць вырабаў з поліпрапілена маюць на паверхні статычную электрычнасць, якая адсарбуе нуклеінавыя кіслоты.Апорная РНК можа насычаць іхадсарбцыйныя эфекты і паменшыць страту мэтавых нуклеінавых кіслот.

2. Інактываваць следавыя нуклеазы: у біялагічных узорах прысутнічаюць розныя нуклеазыасяроддзя.Poly A можа інактываваць следавыя нуклеазы на этапах экстракцыі або захаванняпалепшыць выхад і стабільнасць мэтавых нуклеінавых кіслот.

3. Суасаджэнне: на этапе ачысткі нуклеінавых кіслот апасродкаванай спіртам асаджэння або звязвання полі А можа суасаджацца з мэтавай нуклеінавай кіслатой або ўтвараць палімерныя часціцы дляпалепшыць аднаўленне.

Спосаб выкарыстання

Вазьміце адпаведную колькасць лиофилизированного парашка, дадайце апрацаваную DEPC ваду або раствор солі гуанідзінурастварыць яго ў 0,1-1 мкг/мкл, затым упакаваць і захоўваць пры -20°C.

Прыкладанні

1. Экстракцыя ДНК/РНК віруса: даданне 1-5 мкг РНК-носьбіта ў лізат можа палепшыць выхад РНК/ДНК, стабілізаваць мэтавую нуклеінавую кіслату і пазбегнуць дэградацыі вычышчанай нуклеінавай кіслаты падчас захоўвання.

2. Пры экстракцыі мікра ДНК/РНК метадам мембраннай калонкі (<1 мкг) даданне РНК-носьбіта да 1-5 мкг спрыяе павышэнню выхаду нуклеінавай кіслаты.

3. На этапе апасродкаванай спіртам асаджэння і канцэнтрацыі нуклеінавых кіслот дабаўленне 1-2 мкг РНК-носьбіта дапамагае палепшыць аднаўленне кароткага сегмента РНК.

4. Даданне 10-100 нг РНК-носьбіта ў рэакцыйны раствор для колькаснай ПЦР дапамагае палепшыць адчувальнасць і знізіць C_Tзначэнне.