Ultra Nuclease класа GMP
Кат. №: HC2016A
UltraNuclease GMP-класа выяўляецца і ачышчаецца ў Escherichia coli (E.coli) з дапамогай генетычнай інжынерыі і падрыхтаваны ў асяроддзі GMP.Гэта можа знізіць глейкасць клеткавага супернатанту і клеткавага лізата ў навуковых даследаваннях, павысіць эфектыўнасць ачысткі бялку і палепшыць функцыянальнае даследаванне бялку.Прадукт можа таксама зніжаць рэшткі нуклеінавых кіслот гаспадара да ўзроўню pg, паляпшаючы прадукцыйнасць і бяспеку біялагічных прадуктаў прымянення, уключаючы ачыстку вірусаў, вытворчасць вакцын і фармацэўтычную вытворчасць бялкоў/поліцукрыдаў.Акрамя таго, прадукт можа таксама прымяняцца для прадухілення зліпання монануклеараў перыферычнай крыві чалавека (PBMC) пры клеткавай тэрапіі і распрацоўцы вакцын.
UltraNuclease пастаўляецца ў выглядзе стэрылізаванага рэактыва, элюированного ў буферы (20 ммоль Tris-HCL рн 8,0, 2 ммоль MgCl, 20 ммоль NaCl, 50% гліцэрыны), з выглядам бескаляровай празрыстай вадкасці.Гэты прадукт вырабляецца ў адпаведнасці з патрабаваннямі GMP і пастаўляецца ў вадкай форме.
Кампаненты
Клас UltraNuclease GMP (250 ЕД/мкл)
Умовы захоўвання
Прадукт пастаўляецца з сухім лёдам і можа захоўвацца пры -25℃~-15°C на працягу двух гадоў.
Калі прадукт адкрыты і захоўваўся пры тэмпературы 4℃ больш за тыдзень, мы рэкамендуем адфільтравацьпрадукт для прадухілення мікробнага заражэння.
Тэхнічныя характарыстыкі
| Хост выразаў | Рэкамбінантныя E. coli з генам UltraNuclease |
| Малекулярная маса | 26,5 кДа |
| такэлектрычная кропка | 6,85 |
| Чысціня | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Буфер захоўвання | 20 мм Tris-HCL pH 8,0, 2 мм MgCl, 20 мм NaCl, 50% гліцэрына |
|
Вызначэнне адзінкі | Вызначэнне адной адзінкі актыўнасці (U) - гэта колькасць фермента, які выкарыстоўваецца длязмяніць значэнне паглынання ΔA260 на 1,0 за 30 хвілін у 2,625 млрэакцыйная сістэма пры 37 ℃ з pH 8,0 (эквівалентна поўнаму пераварванню37 мкг ДНК спермы ласося ў алігануклеатыды). |
Інструкцыя
1. Узор Калекцыя
Прыліпшыя клеткі: выдаліце асяроддзе, прамыйце клеткі PBS і выдаліце супернатант.
Завісь клетак: збярыце клеткі цэнтрыфугаваннем, прамыйце клеткі PBS, цэнтрыфугуйце пры 6000абаротаў у хвіліну на працягу 10 хвілін, збярыце асадак.
Кішачная палачка: збярыце бактэрыі цэнтрыфугаваннем, адзін раз прамыйце PBS, цэнтрыфугуйце пры 8000абаротаў у хвіліну на працягу 5 хвілін і збярыце асадак.
2. Узор лячэння
Апрацуйце сабраныя асадкі клетак буферам для лізісу ў суадносінах масы (г) да аб'ёму (мл) 1:(10-20) або механічнымі або хімічнымі метадамі на лёдзе або пры пакаёвай тэмпературы (1 г асадка клетак змяшчае каля
109 клетак).
3. Лячэнне ферментамі
Дадайце 1-5 мм MgCl ў рэакцыйную сістэму і давядзіце рн да 8-9.
Дадайце UltraNuclease у суадносінах 250 адзінак, каб расшчапіць 1 г асадка клетак, інкубуйце пры 37 ℃ больш за 30 хвілін.Калі ласка, звярніцеся да формы «Рэкамендаваны час рэакцыі», каб выбрацьпрацягласць лячэння.
4. Супернатант Калекцыя
Цэнтрыфугуйце пры 12 000 абаротаў у хвіліну на працягу 30 хвілін і збярыце супернатант.
Заўвага: Калі раствор з'яўляецца кіслотным або шчолачным або ўтрымлівае высокую канцэнтрацыю солі, мыйных сродкаў абодэнатуратаў, калі ласка, павялічце дазоўку фермента або адпаведна падоўжыце час лячэння.
Рэкамендаваныя ўмовы рэакцыідапаўненні
| Параметр | Аптымальны стан | Эфектыўны кандыцыянер |
| Mg²+канцэнтрацыя | 1-5 мм | 1-10 мм |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| тэмпература | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Канцэнтрацыя DTT | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Канцэнтрацыя меркаптаэтанолу | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Канцэнтрацыя аднавалентных катыёнаў | 0-20 ммоль | 0-150 мМ |
| Канцэнтрацыя фасфатаў | 0-10 ммоль | 0-100 мМ |
Рэкамендуецца Рэакцыя Час (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Колькасць UltraNuclease (канчатковая канцэнтрацыя) | Час рэакцыі |
| 0,25 ЕД/мл | >10 гадзін |
| 2,5 ЕД/мл | >4 гадзін |
| 25 ЕД/мл | 30 хв |
Заўвагі:
Калі ласка, апранайце неабходныя СІЗ, такія як лабараторны халат і пальчаткі, каб гарантаваць ваша здароўе і бяспеку!
