2×PCR Master Mix (без фарбавальніка)
PCR Master Mix - гэта своеасаблівы гатовы да выкарыстання стандартны раствор для ПЦР, які ўключае ДНК-палімеразу Taq, сумесь dNTP MgCl2 і аптымізаваны буфер.Падчас рэакцыі для ампліфікацыі можна дадаваць толькі праймер і шаблон, што значна спрашчае этапы эксперыменту.Гэты прадукт змяшчае выдатныя стабілізатары і можа захоўвацца 3 месяцы пры тэмпературы 4 ℃.ПЦР-прадукт мае выступ 3'-dA і можа быць лёгка кланаваны ў Т-вектар.
Умовы захоўвання
Прадукт варта захоўваць пры -25 ℃ ~ -15 ℃ на працягу двух гадоў.
Тэхнічныя характарыстыкі
| Вернасць (супраць Taq) | 1× |
| Гарачы старт | No |
| Навісь | 3′-А |
| Палімераза | Taq ДНК-палімераза |
| Фармат рэакцыі | SuperMix або Master Mix |
| Хуткасць рэакцыі | Стандартны |
| Тып прадукту | Майстар-мікс ПЦР (2×) |
Інструкцыя
1.Сістэма рэакцыі
| Кампаненты | Памер (мкл) |
| Шаблон ДНК | Падыходзіць |
| Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Да 50 |
2.Пратакол узмацнення
| Крокі цыкла | Тэмпература (°C) | Час | Цыклы |
| Папярэдняя дэнатурацыя | 94 ℃ | 5 хвілін | 1 |
| Дэнатурацыя | 94 ℃ | 30 сек | 35 |
| Адпал | 50-60 ℃ | 30 сек | |
| Пашырэнне | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Канчатковае пашырэнне | 72 ℃ | 10 хвілін | 1 |
Заўвагі:
1) Выкарыстанне шаблону: 50-200 нг геномнай ДНК;0,1- 10 нг плазмидной ДНК.
2) Мг2+канцэнтрацыя: гэты прадукт змяшчае 3 мМ MgCl2, прыдатны для большасці рэакцый ПЦР.
3) Тэмпература адпалу: звярніцеся да тэарэтычнага значэння Tm праймераў.Тэмпература адпалу можа быць на 2-5 ℃ ніжэй, чым тэарэтычнае значэнне грунтоўкі.
4) Час падаўжэння: для малекулярнай ідэнтыфікацыі рэкамендуецца 30 сек/кб.Для кланавання генаў, 60сек/кб рэкамендуецца.
Заўвагі
1.Для вашай бяспекі і здароўя, калі ласка, апранайце лабараторныя халаты і аднаразовыя пальчаткі для працы.
2.Толькі для навуковага выкарыстання!
