2×PCR Super Mix (з фарбавальнікам)
2× PCR Master Mix змяшчае ДНК-палімеразу Taq, dNTP і іншыя неабходныя для ПЦР кампаненты.Майстар-мікс стабільны на працягу 3 месяцаў пры тэмпературы 4℃ з дапамогай нашых індывідуальных стабілізатараў.Раствор папярэдняй сумесі аптымізаваны для звычайнай ПЦР і гатовы да выкарыстання з даданнем шаблону ДНК і праймераў.Прадукты ПЦР можна загрузіць непасрэдна для электрафарэзу з папярэдне загружаным фарбавальнікам бромфенолавы сіні.Ампліфікаваныя прадукты ўтрымліваюць выступы 3'-dA і могуць быць лёгка кланаваныя ў Т-вектар.2×PCR Master Mix спрашчае працэдуру ПЦР і памяншае заражэнне.
Умовы захоўвання
Прадукты павінны захоўвацца пры -25 ℃ ~ -15 ℃ на працягу 2 гадоў.
Тэхнічныя характарыстыкі
| Вернасць (супраць Taq) | 1× |
| Гарачы старт | No |
| Навісь | 3'-А |
| Палімераза | Taq ДНК-палімераза |
| Фармат рэакцыі | SuperMix або Master Mix |
| Хуткасць рэакцыі | Стандартны |
| Тып прадукту | Майстар-мікс ПЦР (2x) |
Інструкцыя
1.Сістэма рэакцыі
| Кампаненты | Аб'ём(мкл) |
| Шаблон ДНК | Падыходзіць |
| Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | да 50 |
2.Пратакол узмацнення
| Крокі цыкла | Тэмпература (°C) | Час | Цыклы |
| Пачатковая дэнатурацыя | 94 | 5 хвілін | 1 |
| Дэнатурацыя | 94 | 30 сек | 35 |
| Адпал | 50-60 | 30 сек | |
| Пашырэнне | 72 | 30-60 сек/кб | |
| Канчатковае пашырэнне | 72 | 10 хв | 1 |
нататка:
1) Выкарыстанне шаблону: 50-200 нг геномнай ДНК;0,1-10нг плазмидной ДНК.
2) Мг2+канцэнтрацыя: гэты прадукт змяшчае 3 мМ MgCl2, прыдатны для большасці рэакцый ПЦР.
3) Тэмпература адпалу: звярніцеся да тэарэтычнага значэння Tm праймераў.Тэмпература адпалу можа быць на 2-5 ℃ ніжэй, чым тэарэтычнае значэнне праймера.
4) Час падаўжэння: для малекулярнай ідэнтыфікацыі рэкамендуецца 30 сек/кб.Для кланавання генаў рэкамендуецца 60 сек/кб.
Заўвагі
1.ПЦР-прадукты з 2× PCR Master Mix не падыходзяць для электрафарэзу ў поліакрыламідным гелі.
2.Для вашай бяспекі і здароўя, калі ласка, апранайце лабараторныя халаты і аднаразовыя пальчаткі для працы.
3.Ён выкарыстоўваецца ТОЛЬКІ для даследчага выкарыстання!
