ДНК-палімераза Hotstart Taq (5u/ul)
ДНК-палімераза Taq - гэта ДНК-палімераза з гарачым стартам з падвойнай блакіроўкай падвойнымі антыцеламі. Гэты прадукт не толькі блакуе актыўнасць 5′→3′-палімеразы ДНК-палімеразы Taq, але таксама блакуе актыўнасць 5′→3′-экзануклеазы.Награванне на працягу 30 секунд пры тэмпературы папярэдняй дэнатурацыі можа цалкам інактываваць антыцелы і вызваліць актыўнасць ДНК-палімеразы і экзануклеазную актыўнасць.Характарыстыка падвойнага блакавання можа не толькі эфектыўна прадухіляць неспецыфічнае ўзмацненне, выкліканае неадпаведнасцю або дымерам праймера, але і эфектыўна інгібіраваць зніжэнне сігналу флуарэсцэнцыі, выкліканае дэградацыяй зонда, каб зрабіць рэагент для выяўлення in vitro больш стабільным падчас транспарціроўкі або выкарыстання ў пакаёвых умовах. тэмпература.
Кампаненты
| Кампанент | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
| Taq ДНК-палімераза(5 ЕД/мкл) | 50 мкл | 200 мкл | 2 мл | 5 мл |
Умовы захоўвання
Прадукт пастаўляецца з сухім лёдам і можа захоўвацца пры -25°C~-15°C на працягу 2 гадоў.
Тэхнічныя характарыстыкі
| Палімераза | Taq ДНК-палімераза |
| Чысціня | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
| Гарачы старт | Убудаваны гарачы старт |
| Хуткасць рэакцыі | Стандартны |
| Актыўнасць экзонуклеазы | 5′→3′ |
Інструкцыя
Налада рэакцыі
| Кампаненты | Аб'ём (мкл) | Канчатковая канцэнтрацыя |
| 2× буферa | 25 | 1× |
| Сумесь праймер/зондб | × | 0,1 мкмоль/л-0,5 мкмоль/л |
| Палімераза Hotstart Taq (5U/мкл) | 1.2 | 0,12 ЕД/мкл |
| Шаблон ДНКc | × | 0,1-100 нг |
| ddH2O | Да 50 | - |
Заўвагі:
1) У адпаведнасці з канкрэтным эксперыментальным прымяненнем неабходна прыгатаваць адпаведны рэакцыйны буфер.
2) Колькасць ДНК і канцэнтрацыя зондаў або праймераў з'яўляюцца рэкамендаванымі канцэнтрацыямі.Аптымальную канцэнтрацыю можна рэгуляваць у залежнасці ад канкрэтных эксперыментальных умоў.
Пратакол цеплавога цыклу
| Крок | тэмпература(°C) | Час | Цыклы |
| Папярэдняя дэнатурацыя | 95 ℃ | 5 хвілін | 1 |
| Дэнатурацыя | 95 ℃ | 15 сек | 45 |
| Адпал / Пашырэнне | 60 ℃а | 30 секb |
Заўвагі:
1) Тэмпература рэакцыі рэгулюецца ў адпаведнасці са значэннем Tm распрацаваных праймераў.
2) Для розных прыбораў кПЦР патрабуецца розны час атрымання флуарэсцэнтнага сігналу, калі ласка, усталюйце ў адпаведнасці з самым кароткім лімітам часу.
Заўвагі
Калі ласка, апранайце неабходныя СІЗ, такія як лабараторны халат і пальчаткі, каб гарантаваць ваша здароўе і бяспеку!
